培養(yǎng)基(Medium）是指供給微生物、植物或動物（或組織）生長繁殖的，由不同營養(yǎng)物質(zhì)組合配制而成的營養(yǎng)基質(zhì)。一般都含有水、氮源、無機鹽(包括微量元素)、碳源、生長因子(維生素、氨基酸、堿基、**素、色素、**和血清等）等。

什么是培養(yǎng)基

培養(yǎng)基(Medium）是指供給微生物、植物或動物（或組織）生長繁殖的，由不同營養(yǎng)物質(zhì)組合配制而成的營養(yǎng)基質(zhì)。

培養(yǎng)基的組成

一般都含有水、氮源、無機鹽(包括微量元素)、碳源、生長因子(維生素、氨基酸、堿基、**素、色素、**和血清等）等。

培養(yǎng)基的作用

培養(yǎng)基既是提供細胞營養(yǎng)和促使細胞增殖的基礎物質(zhì)，也是細胞生長和繁殖的生存環(huán)境。

培養(yǎng)基的分類

（1）按照配置原料來劃分，分為自然培養(yǎng)基、合成培養(yǎng)基、半合成培養(yǎng)基。

（2）按照物理狀態(tài)來劃分，分為固體培養(yǎng)基、液體培養(yǎng)基、半固體培養(yǎng)基。

（3）按照營養(yǎng)成分來劃分，分為基本培養(yǎng)基（*低限度培養(yǎng)基)、完全培養(yǎng)基（血清細胞培養(yǎng)基)、補充培養(yǎng)基。

（4）按照微生物種來劃分，分為**培養(yǎng)基、放線菌培養(yǎng)基、酵母菌培養(yǎng)基、霉菌培養(yǎng)基。

（5）按照用途來劃分，分為基礎培養(yǎng)基、加富培養(yǎng)基、選擇培養(yǎng)基、鑒別培養(yǎng)基。

培養(yǎng)基分類詳解

根據(jù)配制原料分類

天然培養(yǎng)基

利用動物、植物或微生物體（包括其提取物）制成

難以確切知道其化學成分，但一般營養(yǎng)豐富，微生物生長旺盛，而且來源廣泛，配制方便，所以較為常用，尤其適合于配制實驗室常用的培養(yǎng)基和大生產(chǎn)上的培養(yǎng)基。穩(wěn)定性常受生產(chǎn)廠或批號等因素的影響。

合成培養(yǎng)基

根據(jù)天然培養(yǎng)基的成分，用化學物質(zhì)模擬合成、人工設計而配制

用已知化學成分的化學藥品配制而成，化學成分精確、重復性強，但價格昂貴，而微生物又生長緩慢，適用于做一些科學研究，例如營養(yǎng)、代謝的研究。

半合成培養(yǎng)基

主要以化學試劑配制，同時還加有某種或某些天然成分

在合成培養(yǎng)基中，加入某種或幾種天然成分；或者在天然培養(yǎng)基中，加入一種或幾種已知成分的化學藥品即成半合成培養(yǎng)基。

根據(jù)物理形態(tài)分類

固體培養(yǎng)基

在培養(yǎng)基中加入凝固劑，有瓊脂、明膠、硅膠等。

常用于微生物分離、鑒定、計數(shù)和菌種保存等方面。

半固體培養(yǎng)基

在液體培養(yǎng)基中加入少量凝固劑而呈半固體狀態(tài)。

可用于觀察**的運動、鑒定菌種和測定噬菌體的效價等方面。

液體培養(yǎng)基

不加任何凝固劑。成分均勻，微生物能充分接觸和利用培養(yǎng)基中的養(yǎng)料。

適于作生理等研究，由于發(fā)酵率高，操作方便，也常用于發(fā)酵工業(yè)。

根據(jù)營養(yǎng)成分分類

基本培養(yǎng)基（*低限度培養(yǎng)基）

只能保證某些微生物的野生型菌株正常生長，是含有營養(yǎng)要求*低成分的合成培養(yǎng)基。

往往缺少某些生長因子，所以經(jīng)過誘變過的營養(yǎng)缺陷型菌株不能生長。

完全培養(yǎng)基（血清細胞培養(yǎng)基）

基本培養(yǎng)基中加入血清、富含氯基酸、維生素和堿基之類的天然物質(zhì)（如酵母浸出物、蛋白胨等），即加入生長因子而成完全培養(yǎng)基。

可用來滿足微生物的各種營養(yǎng)缺陷型菌株的生長需要。

補充培養(yǎng)基

往基本培養(yǎng)基中有針對性加進某一種或某幾種該菌株不能合成的營養(yǎng)因子而組成。

滿足相應的營養(yǎng)缺陷型菌株生長的需要。

培養(yǎng)基的保管注意事項

（1）培養(yǎng)基配成后一般需測試并調(diào)節(jié)pH，還須進行**，通常有高溫**和過濾**。

（2）培養(yǎng)基由于富含營養(yǎng)物質(zhì)，易被污染或變質(zhì)。配好后不宜久置，*好現(xiàn)配現(xiàn)用。

（3）一般培養(yǎng)基在受熱、吸潮后，易被**污染或分解變質(zhì)，因此一般培養(yǎng)基**須防潮、避光、陰涼處保存。

（4）對一些需嚴格**的培養(yǎng)基（如組織培養(yǎng)基），較長時間的貯存，**須放在3-6℃的冰箱內(nèi)。由于液體培養(yǎng)基不易長期保管，需制成粉末。

培養(yǎng)基使用常見問題解答

（1）含瓊脂培養(yǎng)基冷卻**25℃后已凝固，如何測定其pH？

答：有專門的固體培養(yǎng)基pH計。

（2）**后的培養(yǎng)基是否都要測pH值？如何測定pH值？

答：每個制備批次的培養(yǎng)基都應測定pH，可采用pH試紙或pH計測量。

（3）稀釋液**后pH值是否有變化？有何影響？（如pH7.0氯化鈉-蛋白胨緩沖液，pH6.8無菌磷酸鹽緩沖液）

答：一般pH有下降現(xiàn)象，約0.2左右，不同培養(yǎng)基pH變化可能不同。

（4）孟加拉培養(yǎng)基是否可以取代玫瑰紅鈉瓊脂進行培養(yǎng)霉菌和酵母菌？

答：根據(jù)中*藥典，采用玫瑰紅鈉瓊脂。

（5）配制PH值7.0氯化鈉-蛋白胨緩沖液時有時因為高壓**器**過程溫度過高而導致培養(yǎng)基混濁了，這種情況緩沖液還能用嗎？

答：建議按正常溫度**，混濁培養(yǎng)基建議不要使用。

（6）含瓊脂培養(yǎng)基在冷藏中形成冰晶怎么處理？銷毀還是加熱再用？

答：建議不要使用。

（7）融化的培養(yǎng)基為什么不能再冷水中冷卻？

答：防止受熱不均引起結塊。

（8）**后，**鍋需自然冷卻降壓才可以打開，這段時間是否會造成過度**。

答：自然冷卻過程已經(jīng)計算在正常**時間內(nèi)了，不會造成過度**。

（9）培養(yǎng)基所用器具若使用濕熱**，是否**須待干燥后才可以使用？若烘干或其它方法，中間過程怎樣防止微生物污染？

答：如果是馬上使用且不是用于非水溶性供試液的制備及實驗，不一定要烘干；否則，應干燥后使用，**及干燥盡量在同一鍋里進行，或用紗布和牛皮紙包扎緊密。

（10）培養(yǎng)基的避光儲存，是否配置好的培養(yǎng)基其全部放避光儲存？

答：*好都避光保存。無條件時，光敏感的培養(yǎng)基一定要。

（11）商品培養(yǎng)基干粉說是加蒸餾水溶解，實際操作是否可以用*化水或注射用水？

答：只要不含有任何可能抑制或影響微生物生長的物質(zhì)的水均可。

（12）培養(yǎng)基及器具**可否同一設備同**時間進行**？

答：*好分開**，條件不允許時可同爐**，前提是都是潔凈無污染的。

（13）培養(yǎng)基的保溫能否用60℃的培養(yǎng)箱，它與45℃—55℃水浴鍋保溫方法有何不同？

答：可以用恒溫培養(yǎng)箱保溫，但保溫溫度一般是50℃左右，且時間不能過長，一般是不超過4小時。

（14）培養(yǎng)基的貯存是否需要放置于2—10℃冰箱內(nèi)？

答：需冷藏保存的培養(yǎng)基外包裝上會寫明。

（15）培養(yǎng)基**后成份會有所蒸發(fā)減少，如何處理這個問題？

答：正常情況下蒸發(fā)量較少，可忽略不計。

（16）培養(yǎng)基融化后出現(xiàn)渾濁是有哪些方面的原因引起的？應如何避免？

答：可能的情況有培養(yǎng)基配置用水不符合規(guī)定、**過程溫度升溫慢或降溫慢、 培養(yǎng)基儲存不當、融化時沸騰時間較長等。

（17）準備好的培養(yǎng)基有效期如何驗證？

答：定期取出培養(yǎng)基驗證其無菌性，促生長能力等方面。

（18）培養(yǎng)基配制好**后，在高壓容器中保溫降**50℃左右，可不可行？

答：建議*好不要，避免過度受熱。

（19）脫水培養(yǎng)基對濕度是否有要求？多少適宜？

答：按要求室溫干燥環(huán)境儲存即可。

（20）培養(yǎng)基pH值測定溫度在25℃，這個溫度應怎么控制？比如固體培養(yǎng)基，固體培養(yǎng)基使用過程中還能調(diào)節(jié)pH值嗎？

答：可水浴控制培養(yǎng)基溫度。

（21）配制培養(yǎng)基過程中，按說明書稱定量，加規(guī)定的*化水，煮沸溶解，為了避免煮沸過程總減少水分，是否要在配制過程適當增加水?比如配硫乙醇酸鹽流體培養(yǎng)基。

答：可適量增加，自己掌握。

（22）商品培養(yǎng)基一定要當天配當天用嗎？可否在一周內(nèi)用完？

答：不是即配即用的培養(yǎng)基的話，儲存得當，可以使用。

（23）稱量培養(yǎng)基時，注意不要吸入粉末，這粉末是指何物？

答：就是你所稱量的干粉培養(yǎng)基 ，因為培養(yǎng)基的粉末對呼吸道有刺激作用，而且培養(yǎng)基中的某些成分，如亞硒酸鹽、疊氮化鈉、乙酰胺等，長期吸入并在體內(nèi)累積到一定量會對人體健康有危害。所以培養(yǎng)基配制稱量需做好個人防護，且*好選擇少粉塵環(huán)保型顆粒培養(yǎng)基。

（24）煮培養(yǎng)基，用不銹鋼鍋在電磁爐上煮可行？硫乙醇培養(yǎng)基是否要煮沸？如何煮沸？用不銹鋼鍋在電磁爐上煮沸可行嗎？可不可以水浴煮沸呢？

答：硫乙醇應煮沸，量大時，我實驗室用不銹鋼鍋在電磁爐上煮沸。不建議水浴煮沸，因為水浴煮沸瓊脂粉很難溶，導致瓊脂分裝不均勻，前段分裝的瓊脂含量少，后段分裝的瓊脂含量高，導致有的管或瓶中的凝固。

（25）如培養(yǎng)基在高壓**器中溫度需自然下降20度才開蓋嗎？

答：高溫**器有**閥，溫度下降到**閥可打開時將培養(yǎng)基取出室溫冷卻，各型號**器**開蓋溫度不盡相同。

應用場景

一般在實驗室使用較多。